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Les principaux équipements du laboratoire de microbiologie

Oct 26, 2021

(1) Banc propre


L'établi propre est un dispositif à flux laminaire partiel, qui peut former localement un environnement de travail hautement propre. Il est composé d'un établi, d'un filtre, d'un ventilateur, d'une boîte à pression statique et d'un corps de support, etc., utilisant de l'air filtré pour atteindre l'objectif de purification et de stérilisation de la zone d'exploitation de l'établi. L'air intérieur traverse la zone de fonctionnement de l'établi dans un état de flux laminaire vertical ou horizontal après le préfiltre et la filtration et le dépoussiérage à haute efficacité. Étant donné que l'air n'a pas de turbulence, toute poussière ou bactérie attachée à la poussière peut être éliminée et il n'est pas facile de se propager et de transférer ailleurs. Par conséquent, la zone d'opération peut être maintenue aseptique.


Par rapport aux chambres stériles et aux boîtes d'inoculation, l'utilisation de bancs propres présente les avantages de bonnes conditions de travail, d'un fonctionnement pratique, d'un effet stérile fiable, de l'absence de dommages au corps humain par les désinfectants, d'une petite zone d'occupation et de la mobilité. S'il est utilisé dans une pièce stérile, l'effet stérile est meilleur. L'inconvénient est qu'il est coûteux et que le préfiltre et le filtre à haute efficacité doivent être nettoyés et remplacés régulièrement.


(2) Pot de stérilisation à la vapeur haute pression (pot de stérilisation à la vapeur haute pression)


Le stérilisateur à vapeur haute pression est un bac métallique fermé à double couche qui peut résister à une certaine pression. Le fond du pot ou de la veste contient de l'eau. Lorsque l'eau bout dans la casserole, la pression dans la casserole augmentera progressivement car la vapeur ne peut pas s'échapper, et le point d'ébullition et la température de l'eau augmenteront en conséquence, afin d'atteindre l'objectif de la stérilisation à haute température. Généralement, tous les micro-organismes, y compris les spores, peuvent être tués en stérilisant à 121 pendant 20 à 30 minutes sous la pression de 0,11 MPa. Si le volume de l'article stérilisé est important et que la pénétration de la vapeur est difficile, la pression de la vapeur peut être augmentée de manière appropriée ou le temps de stérilisation peut être prolongé.

Il existe de nombreux types d'autoclaves tels que les autoclaves horizontaux, verticaux et portables. Dans les laboratoires de microbiologie, les autoclaves portables et verticaux sont les plus couramment utilisés. Par rapport au pot de stérilisation à pression normale, les avantages du pot de stérilisation à haute pression sont le peu de temps requis pour la stérilisation, l'économie de carburant et une stérilisation complète. L'inconvénient est qu'il est cher et que la capacité de stérilisation est faible.


(3) Incubateur (CultureBox)


L'incubateur est un équipement spécial pour la culture de micro-organismes. L'incubateur de type chauffant est un dispositif de culture à volume constant et à température constante synthétisé par un fil de four électrique et un contrôleur de température, avec différentes tailles et spécifications. Les incubateurs couramment utilisés dans les laboratoires de microbiologie ont un volume de travail de 450×450×350mm3 ou 650×500×500mm3, ce qui convient à la culture de divers micro-organismes entre la température ambiante et 60°C. À l'heure actuelle, avec le développement du niveau scientifique, la perfection et le prix des équipements d'incubation sont très différents. Il existe divers incubateurs avec une structure raisonnable et des fonctions complètes, tels qu'un incubateur à température constante, un incubateur à température et humidité constantes, un incubateur à basse température, un incubateur de micro-organismes polyvalent et un incubateur à dioxyde de carbone. Certains sont contrôlés par un ordinateur, et plusieurs chronologies peuvent être sélectionnées pour modifier la différence de température, surmontant ainsi l'influence de la température ambiante, et la température requise pour la culture peut être atteinte tout au long de l'année.


L'incubateur microbien polyvalent est un dispositif de fermentation liquide microbienne qui intègre le chauffage, le refroidissement et l'oscillation. La température de la salle de travail est choisie arbitrairement dans la plage de 15 à 50 . Après la sélection, il est automatiquement contrôlé par le contrôleur de température pour maintenir une température constante dans la salle de travail. En même temps, il est équipé d'un système de contrôle de vitesse à thyristor et la vitesse de l'oscillateur peut être ajustée arbitrairement dans la plage de 1 à 220 tr/min.


(4) Boîte de séchage


La boîte de séchage est un équipement utilisé pour éliminer l'humidité ou d'autres solutions volatiles des matériaux humides et à l'intérieur et à l'extérieur des récipients. Il existe de nombreux types, y compris le type de boîte, le type de tambour, le type de suite, le type rotatif, etc. Les laboratoires de microbiologie utilisent souvent des étuves de séchage de type caisson de différentes tailles et spécifications. La salle de travail est équipée de panneaux mobiles en treillis métallique, ce qui est pratique pour placer les articles séchés. L'étuve de chauffage et de chauffage est également composée d'un fil de four électrique et d'un contrôleur de température, et la température peut être ajustée arbitrairement de la température ambiante à 300 ℃. Certains fours de séchage utilisent des thermomètres conducteurs comme composants sensibles, combinés à des transistors et des relais pour former un système de contrôle automatique, qui surmonte les inconvénients du contrôle de la dilatation thermique des tubes métalliques. De plus, il existe une étuve de séchage sous vide (équipée d'une pompe à vide et d'un baromètre), qui peut fonctionner à pression normale ou à pression réduite.


(5) lit secouant


Shaker est également appelé agitateur de flacon. C'est un petit dispositif expérimental pour cultiver des micro-organismes aérobies ou utilisé pour l'expansion des graines. Les agitateurs couramment utilisés sont alternatifs et rotatifs. La fréquence alternative de l'agitateur alternatif est généralement de 80 à 140 fois/min, et la course est généralement de 5 à 14 cm. Si la fréquence est trop rapide, le trait est trop important ou la quantité de liquide dans le flacon est trop importante, le liquide éclaboussera l'embouchure du flacon de pansement lors de l'agitation. Sur les tampons de gaze ou de coton, provoquant une contamination par des bactéries, ce qui est plus susceptible de se produire lors du démarrage. L'excentricité de l'agitateur rotatif est généralement comprise entre 3 et 6 cm, et le nombre de tours est de 60 à 300 tr/min.



L'oxygène nécessaire au bouillon de fermentation dans le flacon de culture (généralement un flacon triangulaire) placé sur l'agitateur est passé à travers la gaze (généralement 8 couches) ou des tampons enveloppés dans l'embouchure de la bouteille, de sorte que la transmission de l'oxygène est liée à la bouche de bouteille. La taille, la géométrie du goulot du flacon, l'épaisseur et la densité du tampon ou de la gaze sont liées. Dans des circonstances normales, le coefficient d'absorption d'oxygène de l'agitateur dépend des caractéristiques de l'agitateur et du volume d'échantillon du flacon.



L'agitateur alternatif utilise le principe de la manivelle pour entraîner l'agitateur à mouvement alternatif. Le corps est une longue armature en fer ou en bois. Il y a une à trois couches de plateaux. Les plateaux ont des trous ronds pour les bouteilles de culture, et un dépasse du trou. Le caoutchouc triangulaire est utilisé pour fixer le flacon de culture et réduire les vibrations du flacon. Le mécanisme de transmission adopte généralement une poulie secondaire pour réduire la vitesse, et la fréquence alternative peut être modifiée en changeant la poulie de réglage de la vitesse. Il y a différents trous excentriques sur la roue excentrique pour ajuster l'excentricité. La fréquence et l'excentricité de l'agitateur alternatif ont un effet significatif sur l'absorption d'oxygène.


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L'agitateur rotatif utilise un arbre excentrique rotatif pour faire pivoter le plateau. Le plateau a une ou deux couches et peut être constitué de plaques d'acier inoxydable, d'aluminium ou de bois. Les trois arbres excentriques sont équipés de boulons qui peuvent être ajustés de haut en bas pour maintenir le plateau à niveau. Ce type de shaker a une structure compliquée et un coût élevé. Ses avantages sont une meilleure transmission de l'oxygène, une faible consommation d'énergie et le milieu de culture n'éclaboussera pas la gaze sur le goulot de la bouteille.


(6) Microscope


Les micro-organismes sont très petits et leur morphologie individuelle et leur structure cellulaire doivent être clairement observées à l'aide d'un microscope. Par conséquent, le microscope est devenu un outil indispensable dans diverses études de microbiologie.



Il existe de nombreux types de microscopes. Selon leur structure, ils peuvent être divisés en deux catégories : les microscopes optiques et les microscopes non optiques. Le microscope optique peut être divisé en un microscope unique et un microscope composé. Le microscope unique le plus simple est la loupe (le grossissement est généralement d'environ 10 fois), et le microscope unique à structure complexe est le microscope à dissection (le grossissement est d'environ 200). Dans les recherches en microbiologie, le microscope composé est principalement utilisé. Parmi eux, les microscopes optiques ordinaires (microscopes à champ lumineux) sont les plus couramment utilisés. En outre, il existe des microscopes à fond noir, des microscopes à contraste de phase, des microscopes à fluorescence, des microscopes à lumière polarisée, des microscopes à lumière ultraviolette et des microscopes inversés. Les microscopes non optiques sont des microscopes électroniques.


(7) Boîte propre


La boîte d'inoculation est divisée en une boîte d'inoculation à souche solide et une boîte d'inoculation à souche liquide. La boîte d'inoculation à souche solide est une petite boîte fermée en bois et verre ou soudée par du plexiglas. Il est divisé en boîtes d'opération double et simple. La boîte peut être grande ou petite. Généralement, la boîte mesure environ 143 cm de long, 86 cm de large, 154 cm de haut et un support de 76 cm. Deux portes coulissantes en verre pouvant être ouvertes et fermées sont installées sur les côtés gauche et droit de la partie supérieure de la boîte pour faciliter l'entrée et la sortie des bactéries. La partie inférieure de la fenêtre est pourvue de deux trous ronds d'un diamètre d'environ 13 cm. L'entraxe entre les deux trous est de 52 cm (même largeur d'épaule). Les ouvertures sont équipées de manchons avec bandes élastiques pour empêcher l'air extérieur d'entrer dans la box lorsque les deux mains opèrent dans la box. Provoquer la pollution à l'intérieur. Pendant le fonctionnement, les deux sont assis l'un en face de l'autre et leurs mains sont étendues dans la boîte à travers les manches. Il est préférable d'installer du verre des deux côtés de la boîte, et le haut de la boîte est en bois ou en verre. Il y a une lampe germicide ultraviolette et une lampe fluorescente pour l'éclairage sur le dessus de la boîte. L'armoire peut être installée avec du bois ou du verre, mais elle doit être scellée.



La boîte d'inoculation de souches liquides est spécialement conçue pour le transfert de souches liquides. Elle est plus étroite et plus longue que la trémie pleine et elle peut être actionnée par deux personnes d'un côté. Il y a une piste et une lumière ultraviolette à l'intérieur. Les deux extrémités de la boîte ont des sorties rectangulaires d'une hauteur de 25cm et d'une largeur de 10cm pour faciliter l'entrée et la sortie des bactéries. L'entrée est équipée d'une petite porte coulissante. Il y a une source de vapeur sous l'entrée et la sortie, et l'entrée et la sortie sont scellées avec de la vapeur pendant l'inoculation pour empêcher les bactéries d'entrer dans la boîte. L'arrière de la boîte est pourvu d'un petit trou dans lequel le tube de transfert de contrainte liquide peut entrer.



Lorsque la boîte d'inoculation est stérilisée, elle est irradiée avec de la lumière ultraviolette pendant 30 minutes. S'il n'y a pas de lampe ultraviolette, utilisez une fumigation au formaldéhyde et au permanganate de potassium (formaldéhyde 10-14mL/m3 + permanganate de potassium 5-7g/m3 espace) pendant plus de 30 minutes. Lors de l'utilisation, placez d'abord les articles et outils requis dans la boîte d'inoculation, puis effectuez la fumigation et la stérilisation aux ultraviolets du médicament, puis effectuez l'inoculation selon l'opération aseptique. La boîte d'inoculation a une structure simple, un faible coût, une désinfection et une stérilisation faciles, un fonctionnement pratique, et elle peut être utilisée par des personnes en dehors de la boîte, même lorsque la température est élevée. L'inconvénient est qu'il faut du temps et du travail pour entrer et sortir du milieu de culture, et qu'il doit être stérilisé avant chaque inoculation.


(8) Réfrigérateur


Il existe deux principaux types de réfrigérateurs dans le laboratoire de microbiologie : les réfrigérateurs ordinaires et les réfrigérateurs congélateurs à basse température. Les réfrigérateurs ordinaires ont généralement deux armoires, à savoir des armoires de stockage frais et des armoires réfrigérées, avec des températures de 4°C et -20°C respectivement ; la température des réfrigérateurs congélateurs à basse température est généralement contrôlée entre -40 et -80°C. Ils peuvent tous être utilisés pour la conservation de souches microbiennes. Les armoires de stockage fraîches sont souvent utilisées pour stocker les souches inclinées, et le temps de conservation est d'environ 3 mois. Plus de 3 mois, la pente va s'assécher, il est donc nécessaire de transférer les bactéries. Si vous souhaitez conserver les souches pendant longtemps, vous devez les traiter et les conserver au congélateur d'un réfrigérateur ordinaire ou d'un congélateur à basse température. Leur durée de conservation est plus longue, généralement supérieure à 1 an.


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